產(chǎn)品中心
人體細(xì)胞
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細(xì)胞名稱(chēng) |
培養(yǎng)條件： |
傳代方法 |
貨號(hào) |
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UT-7 人急性成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
DMEM+10% FBS +1%雙抗 |
維持細(xì)胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml，1：2傳代，2~3天1次。 |
C1171 |
詳細(xì)介紹：
細(xì)胞名稱(chēng) 人類(lèi)原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞；UT-7
形態(tài)特性 圓形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)，有1%~2%的細(xì)胞可輕微貼壁。
特征特性 該細(xì)胞于1988年建系；源于一名64歲患有急性粒細(xì)胞白血?。?span>AML M7）的男性的骨髓；對(duì)多種細(xì)胞因子有反應(yīng)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；5-7u/ml Epo
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml，1：2傳代，2~3天1次。
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
相關(guān)資料：
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR
Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：10，12；D18S51：14，17；D19S433：14，14.2；D21S11：31.2；D2S1338：18，23；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：8；D8S1179：11，15；FGA：23；TH01：6，9；TPOX：10；vWA：14，18，19；
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞服務(wù)內(nèi)容:
1、協(xié)助引進(jìn)科研急需 的細(xì)胞株/系。
2、提供細(xì)胞保藏服務(wù)。
3、提供細(xì)胞供應(yīng)服務(wù)。
4、提供細(xì)胞篩選或建立特殊細(xì)胞株/系的服務(wù)。
5、 提供與細(xì)胞培養(yǎng)配套的部分試劑
6、 提供支原體等各項(xiàng)檢測(cè)的技術(shù)服務(wù)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備培養(yǎng)基；北美胎牛血清，10%；雙抗1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法： 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
1. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
2. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
3. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。 下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
