技術(shù)文獻(xiàn)
技術(shù)文獻(xiàn)
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分。
Atropellis pinicola松生枝干潰瘍病菌PCR試劑盒
Atropellis piniphila嗜松枝干潰瘍病菌PCR試劑盒
Avocado Sunblotch Viroid(ASBVd)鱷梨日斑類病毒RT-PCR試劑盒
Banana Bract Mosaic Virus(BBrMV)香蕉苞片花葉病毒RT-PCR試劑盒
Barley Mild Mosaic Virus(BaMMV)大麥輕度花葉病毒RT-PCR試劑盒
Barley Stripe Mosaic Virus(BSMV)大麥條紋花葉病毒RT-PCR試劑盒
Barley Yellow Dwarf Virus(BYDV)大麥黃矮病毒RT-PCR試劑盒
Barley Yellow Mosaic Virus(BaYMV)大麥黃花葉病毒RT-PCR試劑盒
Bean Common Necrosis Virus(BCMNV)菜豆普通壞死病毒PCR試劑盒
Bean Pod Mottle Virus(BPMV)菜豆莢斑駁病毒RT-PCR試劑盒
Bean Yellow Mosaic Virus(BYMV)菜豆黃斑花葉病毒PCR試劑盒
Beet Mosaic Virus(BtMV)甜菜花葉病毒RT-PCR試劑盒
Beet Necrotic Yellow Vein Virus(BNYVV)甜菜壞死黃脈病毒RT-PCR試劑盒
Beet Yellows Virus(BYV)甜菜黃化病毒PCR試劑盒
Blueberry stunt phytoplasma藍(lán)莓矮化植原體PCR試劑盒
Botryosphaeria laricina落葉松枯梢病菌PCR試劑盒
Botryosphaeria stevensii蘋果殼色單隔孢潰瘍病菌PCR試劑盒
Botrytis cinerea灰霉菌PCR試劑盒
Broad Bean Stain Virus(BBSV)蠶豆染色病毒RT-PCR試劑盒
Broad Bean Wilt Virus I(BBWV I)蠶豆枯萎病毒1型RT-PCR試劑盒
Broad Bean Wilt Virus II (BBWB II)蠶豆枯萎病毒2型RT-PCR試劑盒