技術(shù)文獻(xiàn)
技術(shù)文獻(xiàn)
一、皮里陶病毒RT-LAMP試劑盒50次稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
Herba houttuyniae魚(yú)腥草染料法PCR鑒定試劑盒
Herba houttuyniae魚(yú)腥草探針?lè)≒CR鑒定試劑盒
Herba leonuri益母草LAMP鑒定試劑盒
Herba leonuri益母草PCR鑒定試劑盒
Herba leonuri益母草染料法PCR鑒定試劑盒
Herba leonuri益母草探針?lè)≒CR鑒定試劑盒
Herba lobeliae chinensis半邊蓮LAMP鑒定試劑盒
Herba lobeliae chinensis半邊蓮PCR鑒定試劑盒
Herba lobeliae chinensis半邊蓮染料法PCR鑒定試劑盒
Herba lobeliae chinensis半邊蓮探針?lè)≒CR鑒定試劑盒
Herba lophatheri淡竹葉LAMP鑒定試劑盒
Herba lophatheri淡竹葉PCR鑒定試劑盒
Herba lophatheri淡竹葉染料法PCR鑒定試劑盒
Herba lophatheri淡竹葉探針?lè)≒CR鑒定試劑盒
Herba lycopi澤蘭LAMP鑒定試劑盒
Herba lycopi澤蘭PCR鑒定試劑盒
Herba lycopi澤蘭染料法PCR鑒定試劑盒
Herba lycopi澤蘭探針?lè)≒CR鑒定試劑盒
Herba lycopodii伸筋草LAMP鑒定試劑盒