技術(shù)文獻(xiàn)
技術(shù)文獻(xiàn)
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
亞碲酸鉀(慶大霉素瓊脂凍干配套試劑)
亞碲酸鉀(四號瓊脂凍干配套試劑)
改良纖維二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)瓊脂基礎(chǔ)
3%氯化鈉三糖鐵瓊脂
Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基(不含瓊脂)
Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基
氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)
60g/L氯化鈉蛋白胨水(PW)
慶大霉素瓊脂
3%氯化鈉溶液
我妻氏血瓊脂
3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂
堿性瓊脂
四號瓊脂
TCBS瓊脂
緩沖-甘油氯化鈉溶液
3%氯化鈉堿性蛋白胨水
堿性蛋白胨水
SCDLP液體培養(yǎng)基
營養(yǎng)瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基)
含鐵牛奶培養(yǎng)基
亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS)
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)
胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)
卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)
緩沖-甘油氯化鈉溶液
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基
Pfizer選擇性腸球菌瓊脂培養(yǎng)基
膽汁液態(tài)培養(yǎng)基
腦—心浸萃瓊脂培養(yǎng)基
腦—心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基