腦心肌炎病毒（Encephalomyocarditis Virus，EMCV）在分類上屬小
RNA 病毒科，心肌病毒屬，是一種無囊膜的單股正鏈 RNA 病毒。由 EMCV 引
起的豬腦心肌炎是豬的一種以腦炎、心肌炎或心肌周圍炎為主要特征的急性傳染
病，給養(yǎng)豬業(yè)造成了極大的經(jīng)濟(jì)損失。本產(chǎn)品適用于檢測豬血清、腦、心肌以及
淋巴結(jié)等組織標(biāo)本或病毒培養(yǎng)液中 EMCV 的 mRNA，適用于 EMCV 感染的輔
助診斷。它具有下列特點(diǎn)：
1. 用于 EMCV 的定性鑒定檢測和分子流行病學(xué)調(diào)查。
2. 能對樣品中 EMCV 進(jìn)行快速檢測，具有良好的特異性和敏感性。
3. 使用一管式 RT-PCR 試劑盒，減少了操作步驟，降低了操作誤差

運(yùn)輸及保存:

使用方法:

一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA，也可以另購本公司的一管式病毒
RANout 或柱式病毒 RNAout，上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對
照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。
最好在專門的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（30 uL 體系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
雙酶一管式 RT-PCR Buffer，2× 15 uL 15 uL 15 uL
EMCV 專一性引物對 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 RNA 1-5 uL 無 無
EMCV 陽性對照 無 2 uL 無
補(bǔ)超純水到 28 uL 28 uL 28 uL
MMLV-Taq Mix 2 uL 2 uL 2 uL
4. 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。
過程 溫度 時間
逆轉(zhuǎn)錄 60℃ 30 分鐘
預(yù)變性 94℃ 5 分鐘
PCR 反應(yīng)
（30 個循環(huán)）
94℃ 30 s
55℃ 30 s
72℃ 30 s
延伸 72℃ 5 分鐘
5. 電泳檢測 RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 286 bp。