虹彩病毒科(Iridoviridae)下分 5 個(gè)屬, 即蛙病毒屬(Ranavirus)、淋巴囊腫
病毒屬(Lymphocystivirus)、細(xì)胞腫大病毒屬(Megeaocytoviurs)、虹彩病毒屬
(Iridovirus)和綠虹彩病毒屬(Chloriridovirus)。其中后 2 個(gè)病毒屬感染昆蟲(chóng), 而
前 3 個(gè)病毒屬的虹彩病毒感染多種水生經(jīng)濟(jì)動(dòng)物并呈全球性分布。
蛙病毒屬是虹彩病毒科中成員最多的一屬，為裸露或有囊膜的二十面體病毒
粒子，基因組為單分子、線狀雙鏈 DNA，病毒直徑約 150-170 nm，DNA 全
長(zhǎng)為 150-170 kb。其中大部分病毒都會(huì)引起水生動(dòng)物疾病, 包括流行性造血器
官壞死病毒(epizootic haematopoietic necrosis virus, EHNV)、斑點(diǎn)叉尾鮰
虹彩病毒(catfishiridovirus)、黑真鮰蛙病毒(ictalurus melas ranavirus)和虹
鱒蛙病毒 (oncorhynchus mykiss virus) 、 歐 鯰 病 毒 (european sheetfishiridovirus,
ESV)、歐洲鮰魚(yú)病毒(european catfish virus，ECV)、飾紋
汀蛙虹彩病毒(bohle iridovirus，BIV)、虎紋蛙病毒(tiger frog virus，TFV)等
數(shù)十種病毒。蛙病毒屬病毒感染宿主范圍廣泛，涉及魚(yú)類(lèi)、兩棲類(lèi)、爬行類(lèi)近百
種水生動(dòng)物, 而且發(fā)病率和死亡率都很高。
鑒于蛙虹彩病毒對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的嚴(yán)重危害, 有必要建立一種準(zhǔn)確、快速、靈
敏的檢測(cè)方法對(duì)其進(jìn)行監(jiān)控, 保證水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。本產(chǎn)品即是基于 PCR
方法對(duì)飾紋汀蛙虹彩病毒 BIV 的快速檢測(cè)試劑盒。它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 625 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

運(yùn)輸及保存:

使用方法:

一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化待測(cè)樣品的 DNA。
二、陽(yáng)性對(duì)照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體菌做陽(yáng)性對(duì)
照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 使用本陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。
最好在專(zhuān)門(mén)的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（25 uL 體系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 樣品 陽(yáng)性對(duì)照 陰性對(duì)照
BIV 專(zhuān)一性引物對(duì) 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 DNA 1-5 uL 無(wú) 無(wú)
BIV 陽(yáng)性對(duì)照 無(wú) 2 uL 無(wú)
補(bǔ)超純水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR。
過(guò)程 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 94℃ 5 min
PCR 反應(yīng)
（30 個(gè)循環(huán)）
94℃ 15 s
57℃ 30 s
72℃ 1 min
延伸 72℃ 2 min
5. 電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 625 bp